抗體的競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定不同于只有單個(gè)抗原決定簇的小分子抗原的競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定，其測(cè)定的可靠性，在很大程度上受競(jìng)爭(zhēng)抗體的特異性和親和力大小的影響，競(jìng)爭(zhēng)抗體與待測(cè)抗體在結(jié)合的特異性及親和力越接近一致，則測(cè)定的可靠性越強(qiáng)，但競(jìng)爭(zhēng)用抗體均為相應(yīng)抗原免疫動(dòng)物所得，與機(jī)體感染病毒后所產(chǎn)生的抗體肯定會(huì)有所差異，因而，在目前HBeAb和HBcAb的臨床檢測(cè)中，常有難以解釋的測(cè)定結(jié)果出現(xiàn)，這與其在方法學(xué)上的固有缺陷是分不開(kāi)的。

      抗體的測(cè)定一般不使用競(jìng)爭(zhēng)法。當(dāng)抗原中雜質(zhì)難以去除或抗原的結(jié)合特異性不穩(wěn)定時(shí)，可采用這種模式測(cè)定抗體。如乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）和乙型肝炎病毒e抗體（HBe·Ab）的測(cè)定，由于e抗原較核心抗原僅多29個(gè)氨基酸，e抗原很容易轉(zhuǎn)變?yōu)楹诵目乖?，因此，HBcAb和HBeAb的測(cè)定均采用競(jìng)爭(zhēng)法。但其測(cè)定具體模式有區(qū)別?？乖墓滔嗷瓤梢灾苯舆M(jìn)行，亦可以通過(guò)相應(yīng)特異抗體而間接固相化。

  HBcAb和HBeAb ELISA測(cè)定具體操作步驟分述如下。

  一、HBcAb的競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定  
 
   1、先將HBcAg在碳酸鹽緩沖液中4~C過(guò)夜包被，形成固相抗原，洗滌去除未與固相結(jié)合或結(jié)合不緊的抗體后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉，洗滌去除未結(jié)合的部分及雜質(zhì)。
   2、同時(shí)加入待測(cè)樣本和酶標(biāo)的特異抗體，溫育一定時(shí)間后洗板；此步中，待測(cè)樣本的抗體將與酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)與固相上特異抗原結(jié)合。
   3、加入酶底物，溫育顯色測(cè)定，顯色的強(qiáng)弱與待測(cè)樣本中的相應(yīng)抗體的含量成反比
                                   
   二、HBeAb的競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定

    1、先將HBeAb在碳酸鹽緩沖液中4℃過(guò)夜包被，形成固相抗體，洗滌去除未與固相結(jié)合或結(jié)合不緊的抗原后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉，洗滌去除未結(jié)合的部分及雜質(zhì)；
    2、同時(shí)加入待測(cè)樣本和中和抗原HBeAg，溫育一定時(shí)間后洗板；此步中，待測(cè)樣本的抗體將與固相抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合與中和抗原HBeAg，待測(cè)樣本中HBeAb濃度越高，則與固相HBe—Ab結(jié)合的HBeAg越少，反之亦然；
    3、加入酶標(biāo)的特異抗體，溫育一定時(shí)間后洗板；此步中，酶標(biāo)抗體將與結(jié)合于固相抗體上的特異抗原結(jié)合；
    4、加入酶底物，溫育顯色測(cè)定，顯色的強(qiáng)弱與待測(cè)樣本中的相應(yīng)抗體的含量成反比