大提柱式真菌DNAout
產(chǎn)品及特點(diǎn) 本產(chǎn)品在天澤基因柱式真菌DNAout（CAT#:70901）基礎(chǔ)上改良而的的大提升級(jí)產(chǎn)品，主要用于大量快速?gòu)母鞣N真菌材料中提取基因組DNA。跟柱式真菌DNAout相比，它具有下列特點(diǎn)：
1. 處理量大，一次可以處理1-3g各種真菌組織。
2. 純度高，OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制劑，得到的DNA可以不經(jīng)稀釋直接用于酶切、PCR、real-timePCR、multiplex PCR、RAPD、RELP、AFLP、Southern Blotting，microsalite analysis等各種后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
3. 產(chǎn)率一般在10-100ug/g真菌樣品。離心吸附柱zui大吸附量為800ug。
4. DNA 片段長(zhǎng)度一般在20-40kb左右。
5. 適用范圍廣，適用于度大多數(shù)真菌材料，包括酵母（S.cerevisiae、S.pomb、Pichia pastoris）等。
規(guī)格及成分 成份 4次包裝（CAT：80926-4）
溶液A 100 mL
溶液B 0.5 mL
溶液C 100 mL
溶液D 125mL
大提離心吸附柱 4 套
通用洗柱液 200 mL
通用洗脫液 5 mL
使用手冊(cè) 1份

運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。溶液B含破壁酶成分，需要-20℃保存
自備試劑 無(wú)。
使用方法 1. 稱(chēng)取1-3g濕的真菌菌絲、孢子、子實(shí)體或10-30mL真菌細(xì)胞沉淀，轉(zhuǎn)移到塑料研缽中，液氮研磨成粉后轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的50mL 塑料離心管中。
注意：避免使用含二氧化硅的玻璃研缽，因?yàn)镈NA會(huì)吸附在表面，影響得率。如果菌絲或子實(shí)體等已經(jīng)十分干燥，則使用量比上面推薦的使用量低5-10倍；如果需要預(yù)先從環(huán)境中對(duì)真菌進(jìn)行純化（如從血液病原真菌中提取DNA，則需要先去除紅細(xì)胞等成份，具體方法請(qǐng)參考相關(guān)文獻(xiàn)和相關(guān)產(chǎn)品的使用手冊(cè)，如紅細(xì)胞裂解液）。
2. 在離心管中加入10 mL 65℃預(yù)熱的溶液A和100uL溶液B并用移液槍頭充分吹打混勻（如果溶液A有沉淀，需先在65℃加熱溶解后搖勻再使用）。
3. 65℃保溫5-10分鐘，其間吹打混勻2-3次。
4. 12000-15000 g室溫離心5分鐘。
5. 將上清轉(zhuǎn)移到新的50mL離心管中。有時(shí)候上清液中還會(huì)有少量細(xì)小懸浮物，但對(duì)后續(xù)操作沒(méi)有影響，不必進(jìn)行特殊處理。
6. 在上清液中加入等體積的溶液C，上下顛倒30秒充分混勻，溶液將呈白色混濁狀。
7. 將其置于冰浴中放置5-10分鐘。
8. 12000-15000 g室溫離心5分鐘，轉(zhuǎn)移上清到新的50 mL塑料離心管中。
9. 加入1.5倍體積（和總體相比）的溶液D，混勻后轉(zhuǎn)移到大提離心吸附柱中。
10. 室溫放置5分鐘。
11. 12000-15000 g室溫離心5分鐘，棄穿透液。
12. 將25 mL通用洗柱液加入離心柱，室溫離心1分鐘，棄穿透液。
13. 重復(fù)12步一次。
14. 空甩1分鐘去除殘留液體。
15. 將離心柱放置在一新的50 mL塑料離心管中，加入1mL DNA洗脫液。
16. 室溫放置5分鐘后離心1分鐘，管底即為真菌DNA溶液，可立即使用，也可長(zhǎng)期保存在－20℃。
17. 可以重復(fù)上步一次，以洗脫更多的DNA。