ELISA試劑質(zhì)量與儀器使用 1 儀器使用 ELISA方法所用儀器相對簡單。移液器要按時校正,這樣檢驗時酶標儀效果會更好。接下來重點講述一下洗板機的使用問題。洗板機經(jīng)常出現(xiàn)的問題有:吸液針頭要接觸酶標板的板底才能吸干凈,而觸碰板底將會對包被物產(chǎn)生影響;手工洗板容易和污染。我們做了手工洗板和機洗板的比較,除了手工洗板比機洗板空白值略低外,其它沒有區(qū)別。 洗板機的使用過程中要注意三個方面:(1)洗不同的酶標板時,注意調(diào)整吸液頭的下降高度,以免因高不適使沖洗針頭卡住酶標板;(2)當吸液針頭有破損時,吸液端由平端變?yōu)榧怃J,板底包被物被破壞可能性增加,對結(jié)果影響較大,應及時更換;(3)洗液量的控制問題,洗液不足會導致洗滌不干凈,尤其是邊緣殘留的酶標物,洗液太多就容易溢出,另外不同試劑的酶標板所使用的洗液量也有可能不同,所以在選擇洗液量的時候要特別注意。 2 試劑質(zhì)量 ELISA試劑盒、顆粒凝集和其它快速診斷試劑。對于試劑本身的質(zhì)量問題,試劑的穩(wěn)定性、敏感性和特異性等指標,由于基層實驗室不能得到血清轉(zhuǎn)化盤和大量的陽性標本,不可能進行自己測定 。 在牛ELISA試劑盒操作中,試劑在測定前一定要在室溫下恒溫30min,如果不經(jīng)過恒溫過程,儲存溫度和室溫的差異會使酶標板上凝集一些小水珠,也使開始反應的溫度不恒定,影響到抗原抗體的結(jié)合與反應的速度。 在儲存上,一般在2~8℃,特別注意試劑盒不能緊貼冰箱儲存室后壁擺放,否則試劑會被冰凍,復融后試劑的總體效價將嚴重偏低,不能使用。 |